|
サンプルをインキュベーターから取り出し顕微鏡で観察する方法では、環境の変化や容器の揺れによる細胞へのストレスに加え、観察位置が再現できない、研究者への負担が大きいなどさまざまな問題点がありました。
BioStation CTは、培養から観察までをすべてインキュベーター内の安定した環境で行うことで、研究者への負担を軽減し、幹細胞をはじめとするライブセルを確実に追跡します。
オートフォーカスでピントずれを抑えた画像を自動的に取得します。多数サンプル、多点、複数倍率、Zスタック（位相差時）などの多彩な画像取得が可能です。また、ユーザーごとに撮影条件を登録することができるので、実験の再現性をサポートします。
培養容器はスケジュールに従って自動的にストッカーから取り出され、搬送ユニットで優しく観察ステージまで搬送されます。
インキュベーター内の高温多湿の環境下で安定駆動する搬送系を搭載し、観察部には培養容器全域を観察できる高精度電動ステージを採用しました。
細胞画像の閲覧、撮影条件／スケジュールの入力や変更が、ネットワーク経由で行え、取得データはローカルパソコンに自動的にダウンロードされます。研究室のデスクや外出先などから、いつでも細胞状態をチェックすることができます。温度・湿度・CO2などの装置のエラー情報もeメールで受信できます。
容器全域を分割して撮影し、タイリング処理によってディッシュ全体の高解像度画像が表示できます。発現頻度が低くて確認しにくいiPSコロニーが容器内のどこに発現していても、確実に捉えることができます。さらに、特定箇所を拡大して高解像度で観察することもできます。
また、培地交換後も位置再現性を保持し、同じ視野を経時的に表示できます。
※容器によってはピントが合わない場合があります。
高感度冷却CCDカメラによる2×、4×、10×、20×、40×の位相差像・蛍光像が観察できます。また、Z方向に最大40枚の位相差撮影が可能なZスタック機能を搭載しています。
培養容器全体の明視野画像により、容器に書かれた手書き情報や培地の色、カビの発生などを装置外から確認することができます。
また、専用画像解析ソフトウェアCL-Quant（オプション）でアルカリホスファターゼ染色後の細胞カウントも可能です。
インキュベーター部の6面に内蔵したパネル状のヒーターで制御するダイレクトヒーティング方式により、高い温度均一性を保ちます。
設定湿度以下になると、自動的に蒸留水をインキュベーター内にエア噴霧して最適湿度を維持。蒸留水はインキュベーターの扉を開けずに給水が可能。バット式のコンタミネーションリスクを低減しています。
装置内は常時モニター・記録しており、いつでも環境データを追跡・確認できます。
サンプルの搬送は液面の揺れを2mm以下に抑えた、ゆるやかな移動を実現。細胞の偏りを抑え、細胞へのストレスも低減します。
インキュベーター内部の過酸化水素ガス除染が可能です。（オプションサービス）＊200V電源が必要です。
容器選択アイコン
観察ウェル選択画像
複数容器を一度に搬入できる可動式ストッカー（オプション）を採用。作業を効率化します。
タイムラプス撮影の倍率、撮影ポイント、蛍光、ステージ移動速度などを選択します。
タイムラプス撮影の撮影間隔やトータル撮影期間を入力します。最短１分間隔でのタイムラプス設定が可能です。
取得した画像は経時的に閲覧できます。
培地交換や継代などの履歴データやシャーレごとのXY位置を記録しているため、専用ホルダーと組み合わせることで、培地交換後も正確に同じ細胞を観察し続けることが可能です。
取得データは二重化と無停電電源装置によって安全に保護されます。また、温湿度や撮影時間などのデータが取得画像に書き込めるので、プレゼンテーション資料の作成が簡単です。
全域の高解像度画像から必要な箇所を拡大できるので、シングルセルの状態からコロニー化した細胞までを高解像度で詳細に観察できます。
ヒト肝幹細胞の分裂過程
容器：6ウェルプレート
倍率：2×
培養期間：1週間
撮影インターバル：2時間
データご提供：横浜市立大学 鄭 允文先生
マウス皮膚線維芽細胞に初期化因子（c-Myc、Klf4）と軟骨細胞誘導因子(SOX9)を遺伝子導入し、細胞を経時的に観察しました。
軟骨細胞に特異的なマーカー（XI型コラーゲン遺伝子のレポーター）の発現により、皮膚細胞から直接軟骨細胞様細胞が作製される過程を観察することに成功しました。The Journal of Clinical Investigation. 2011;121(2):640-657
6ウェルプレート全域を1日おきに観察（倍率2倍）。
・位相差像とGFP（XI型コラーゲン遺伝子のレポーター）のマージ画像（右）
・6ウェルプレートの全域蛍光観察画像（下）
データご提供：大阪大学大学院 医学系研究科 骨・軟骨形成制御学 妻木範行准教授
マトリゲル®、MEF-CM存在下で培養したヒトES細胞（h9株）がアポトーシスを起こす過程を観察しました。BMP４添加によって引き起こされる細胞膜の変化を検出するプローブとして、Annexin V（赤蛍光）を利用しています。
データご提供：Jamie McNicol, McMaster University
位相差画像からコロニーを自動抽出し、iPS化したコロニーかiPS化が不十分なコロニーかも自動判別できます。さらに、iPSコロニー/非iPSコロニーの面積の測定や、iPS細胞のコロニー数のカウントができます。
マウスiPS細胞のリプログラミング過程
未分化マーカーであるNanog-GFPの発現の有無と位相差画像から検出したコロニーの情報を組み合わせて、iPSコロニー（青）または非iPSコロニー（ピンク）を自動判定できます。
GFP：Nanog-GFP
DsRed：レトロウイルスより導入
容器：100mmディッシュ
倍率：2×
培養期間：3週間
インターバル：4時間
データご提供：埼玉医科大学 加藤英政先生
非細胞領域を抽出し、その経時的変化を数値化します。細胞の転移能の比較検討が可能です。
腎がん細胞（KMRC-1）に抗がん剤スニチニブ（SUTENTR）を添加し、細胞運動が阻害されることをスクラッチアッセイで定量化した。BioStationCTにおいて3時間間隔でタイムラプス観察を行い、解析ソフトウェアCL-Quantで細胞領域の数値化を行った。
サンプルご提供：金沢医科大学 腎機能治療学 友杉直久教授、丸晋太朗先生
位相差画像から細胞数のカウントが可能です。
幹細胞の未分化状態を評価するAP染色を行った後、BioStationCTでマクロ像を取得することで、AP染色陽性コロニーのカウントが可能です。
オプションのO2レギュレーターとN2発生装置の組み合わせで、低酸素環境下での培養過程の観察が可能です。
光源には長寿命で低コストのLED照明を採用。蛍光フィルターブロックを5つまで装着可能です（同時取得は3色まで）。CFP、YFP、Kusabira Orange、DsRed、Texas Red、Cy5などの蛍光タンパク質の発現確認に有効です。
光毒性の低減
位相差でのオートフォーカスと、励起照明に同期させたカメラ撮影により、励起時間を短縮。試料の褪色を防ぎ、細胞への光毒性を最小限に抑えます。
複数容器を一度に搬入できる可動式ストッカーです。
| 操作方法 | タッチパネル式液晶ディスプレイによる操作 ネットワーク経由での操作 （ウェブブラウザ：Internet Explorer®使用） |
|---|---|
| インキュベーター容量 | 460L |
| 温度制御 | 制御方式：ヒーターパネルによるダイレクト方式 制御可能範囲：室温＋5℃〜Max 42℃、0.1℃単位 |
| 湿度制御 | 制御方式：エア噴霧式加湿方式 制御可能範囲：70〜95％、1％単位 |
| CO2濃度制御 | CO2供給方式：外部CO2ボンベの接続による 制御可能範囲：0〜20％、0.1％単位 |
| O2濃度制御 （オプション） |
制御方式：オプションのN2発生装置供給による 制御可能範囲：0〜20％、1％単位 |
| 対応培養容器 | ディッシュ：Φ35mm、Φ60mm、Φ100mm ウェルプレート：4ウェル、6ウェル、12ウェル、24ウェル、48ウェル、96ウェル 培養フラスコ：25 cm2、75 cm2（ストッカースライダーオプションでは使用不可） |
| サンプル格納 ストッカー |
3列×10段（オートクレーブ滅菌可能） |
| マクロ観察 | 専用カメラにより試料全体を撮影 カメラヘッド：カラーCCDカメラ（1280×960ピクセル） 明視野：バックライト照明 |
| ミクロ観察 | 倍率：2×、4×、10×、20×、40× 中間変倍：4倍、2倍、1倍、0.5倍 対物レンズ：4×（Plan Apo DLL）、10×（Plan Fluor ADL） カメラヘッド：2/3型冷却CCDカメラ（100万画素） 位相差：赤色高輝度LED照明、位相リング自動切替え 落射蛍光（オプション）：LED 438nm、472nm、白色（蛍光フィルターキューブを5つまで装着可能） |
| 観察範囲 | X-Y軸移動距離：120×90mm Z軸移動距離：4mm |
| Zフォーカス検出方式 | Z軸スキャンによる画像コントラスト検出 |
| 観察手段 | 装置タッチパネル式液晶ディスプレイ、リモート接続パソコンモニターによる |
| 電源 | 電源容量：100VAC±10％、消費電力(Max)：1300VA |
| 質量 | 約470kg |
| 使用環境 | 温度：＋15〜＋28℃ 湿度：60％ RH Max（結露なきこと） |
（単位：mm）
（単位：mm）
